溶血性鏈球菌檢測

溶血性鏈球菌在自然界中分布較廣，是一種常見的病原微生物，呈球形或橢圓形，直徑0.6~1.0μm，呈鏈狀排列，長短不一，從4~8個至20~30個菌細胞組成不等，鏈的長短與細菌的種類及生長環境有關。它廣泛存在于水、空氣、塵埃、糞便及健康人和動物的口腔、鼻腔、咽喉中，可通過直接接觸、空氣飛沫或皮膚、黏膜傷口感染傳播，而被污染的食品如奶、肉、蛋及其制品也會使人類感染。

1、樣品處理：取25g固體（或25mL液體）檢樣加入225mL滅菌生理鹽水，制成混懸液。

2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯，或直接劃線于血平板（如檢樣污染嚴重，可同時接種5mL至匹克氏肉湯），36℃培養24h，接種血平板，36℃培養24h,挑起乙型溶血圓形突起的細小菌落，在血平板上分純，觀察在液體和固體中的培養特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態，并進行鏈激酶試驗和桿菌肽敏感試驗。

3、鏈激酶試驗：吸取草酸鉀血漿0.2mL，加0.8mL滅菌生理鹽水，混勻，再加入鏈球菌18-24h 36℃肉浸液肉湯培養物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL，混勻，置于36℃水浴10min，血漿混合物自行凝固，觀察凝塊重新完全溶解的時間，完全溶解為陽性，如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照，用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。

4、桿菌肽敏感試驗：取典型菌落的菌液涂布于血平板上，用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上，36℃培養18-24h，如有抑菌圈出現即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。

GB 4789.11-2014 食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 β型溶血性鏈球菌檢驗

GB/T 4789.11-2003 食品衛生微生物學檢驗 溶血性鏈球菌檢驗

GB/T 18203-2000 室內空氣中溶血性鏈球菌衛生標準

SN/T 4624.5-2016 入境環保用微生物菌劑檢測方法 第5部分：β型溶血性鏈球菌

SN/T 2754.9-2011 出口食品中致病菌環介導恒溫擴增（LAMP）檢測方法.第9部分：溶血性鏈球菌

DB15/T 2071-2021  動物墊料中β-溶血性鏈球菌檢測

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GB/T 14926.16-2001 實驗動物 乙型溶血性鏈球菌檢測方法

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