致突變試驗即化學致突變物的檢測試驗，是指對致癌物質進行初篩，是人類預防癌癥的重要手段，其中以細菌致突變試驗應用最為廣泛。中科檢測動物毒理安全性評價中心，致突變試驗的骨髓細胞微核試驗方法具有CMA檢測資質。

　　致突變試驗的目的

　　致突變效應是指環境污染物或其他環境因素引起生物細胞的遺傳物質發生突然改變的一種作用，這種變化的遺傳物質，在細胞分裂繁殖過程中可傳遞給子代細胞，使其具有新的遺傳特性。致突變作用可分為基因突變和染色體畸變兩大類。致突變試驗也常叫做基因突變試驗和染色體畸變試驗。

　　致突變試驗的目的是檢驗受試物有無致突變作用，也可用作致癌物快速篩檢試驗。

　　致突變試驗方法

　　艾姆斯（Ames）試驗法：

　　即鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動物微粒體酶試驗法，亦稱微粒體間介法，是一種利用微生物進行的體外基因突變試驗法。此法由Ames氏首創，因之而命名。本法是利用突變型微生物，即組氨酸缺陷型的鼠傷寒沙門氏菌菌株（這些菌株喪失合成生長所必需的組氨酸的能力，在組氨酸缺乏的培養基上不能生長），在缺乏組氨酸的瓊脂平皿上培養，如果受試物不具致突變性，則突變型鼠傷寒沙門氏菌不能正常生長。如果受試物具有致突變作用，則可使此種突變型菌株發生回復突變，成為野生型，恢復其合成組氨酸的能力，故可在組氨酸含量不足的培養基上生長并形成菌落。

　　染色體畸變分析試驗：

　　直接觀察在受試物作用下，生物細胞染色體所發生的結構或數目的改變。試驗可用體細胞或生殖細胞進行。一般以骨髓細胞或外周血細胞代表體細胞，以睪丸精原細胞代表生殖細胞。通常設2~3個試驗組和一個對照組，必要時設陽性對照組。在最后一次飼喂受試物后6小時，給動物注射秋水仙堿，使細胞有絲分裂停留在中期，以利觀察。2~3小時后宰殺動物，取出胸骨（或股骨）骨髓或睪丸，將骨髓細胞或精原細胞經制片處理和染色，鏡檢染色體有無結構異常和數目改變，計算細胞畸變率和染色體畸變率。

　　骨髓細胞微核試驗：

　　微核是骨髓中正在分裂的細胞經致突變物作用后，染色體發生斷裂，有一部分斷片存留在間期細胞內形成的一個或幾個圓形結構，較普通細胞核小，故稱微核。微核的出現，表明遺傳物質已發生突變。試驗按一定劑量與次數給予受試物后，將動物宰殺，取出骨髓，混以胎牛或小牛血清，制片染色后鏡檢，計數多染紅細胞中的微核，求出微核出現率。

　　顯性致死突變試驗：

　　其原理是根據哺乳動物的生殖細胞發生突變時，常不能與異性生殖細胞結合，易出現受精卵在著床前死亡或著床后胚胎早期死亡現象。試驗時先使成年雄性大鼠或小鼠攝入受試物，然后將其與未攝入受試物的雌性動物按1雄2雌的比例同籠交配。小鼠連續交配6~8周，大鼠8~12周，每周更換一批雌鼠。在雌鼠受孕后12~13天，將其剖腹取出子宮，檢查并記錄活胎數、早期死亡胚胎數和晚期胚胎死亡數。由于顯性致死突變主要表現為早期胚胎死亡，故一般以每劑量組受孕雌鼠平均早期胚胎死亡數來表示受試物致突變作用的強弱。

　　姊妹染色單體交換試驗：

　　簡稱SCE試驗。一般每條染色體是由兩個染色單體組成。很多化學致突變物可使兩個染色單體中的脫氧核糖核酸發生互換。因此，姊妹染色單體交換出現頻率如果增高，即表明受試物具有致突變作用。試驗可在體外也可在體內進行。體外試驗法常用外周血淋巴細胞，將經不同劑量受試物處理的細胞在含有5一溴脫氧尿嘧啶核苷的培養液中作短期培養，再加入秋水仙堿培養，然后制片、染色鏡檢，求出平均每個細胞姊妹染色單體互換的數目。體內試驗法常用哺乳動物，飼喂受試物后，取骨髓細胞制片、染色和鏡檢計數。

　　DNA修復合成試驗：

　　致突變物及致癌物可使細胞DNA（脫氧核糖核酸）受到損傷，然后還將發生修復合成。但此時的DNA合成不是發生在細胞周期的S期（正常的DNA合成期），而是在S期以外，區別于正常合成程序，所以稱為程序外DNA合成。試驗多用大鼠原代肝細胞或二倍體人類成纖維細胞，在體外進行細胞培養時加入受試物，并加入DNA合成所需的胸腺嘧啶核苷，根據DNA中參入胸腺嘧啶核苷的數量來判斷DNA受損情況。