
紡織品抗菌測試定量方法介紹:振蕩法


紡織品抗菌測試的定量方法之一是振蕩法,這種方法特別適用于非溶出型抗菌紡織產品,包括羽絨、纖維、紗線、織物以及特殊形狀的制品等各類紡織品。振蕩法的優點在于它適用于大多數類型的試樣,包括粉末狀、有毛或羽的衣物、凸凹不平的織物等,并且對于水溶液中非溶出型的試樣也能評價其抗菌性能。
作為第三方檢測中心,中科檢測機構擁有CMA和CNAS認證檢測資質,檢測設備齊全,數據科學可靠,可出具國家認可的紡織品抗菌測試報告。
紡織品抗菌測試標準
GB/T 20944.3-2008 《 紡織品 抗菌性能的評價第3部分:振蕩法》適用羽絨,纖維,紗線,織物,以及特殊形狀的制品等各類紡織產品,尤其適用于非溶出型抗菌紡織織物。
將試樣與對照樣分別裝入一定濃度的試驗菌液的三角燒瓶中,在規定的溫度下振蕩一定時間,測定三角燒瓶內菌液在振蕩前及振蕩一定時間后的活菌濃度,計算抑菌率,以此評價試樣的抗菌效果。
抗菌測試用細菌
應使用下列革蘭氏陽性和其中一種革蘭氏陰性菌種
金黃色葡萄球菌 Staphylococcusaureus(ATCC6538)革蘭氏陽性,
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella pneumoniae(ATCC4352)革蘭氏陰性,
大腸桿菌Escherichiacoli(8099或ATCC 11229)革蘭氏陰性。
注1:可使用加入世界菌種保藏聯合會(WFCC)的菌種保藏機構提供的、與上述菌種等效的試驗細菌。
注2:根據需要,可采用其他的試驗菌種,培養基成分、培養溫度和培養方法可根據需要調整。
抗菌測試步驟
1、試樣及試劑裝瓶
準備9個250mL三角燒瓶。在其中3個燒瓶中各加入對照樣0.75g±0.05g,3個燒瓶中各加入抗菌織物試樣0.75g±0.05g,另3個燒瓶不加試樣作為空白對照。然后在每個燒瓶中各加入70 mL±0.1mL0.03 mol/LPBS 緩沖液。
若需要,可另增加3個三角燒瓶,各裝入0.75g±0.05g未經抗菌處理織物試樣,并各加入70ml,±0.1ml,0.03mol/,PBS緩沖液,以考察未經抗菌處理織物試樣的相關性能。
2、“0”接觸時間制樣
用吸管往3個對照樣燒瓶和3個對照燒瓶中各加入5mL接種菌液。蓋好瓶塞,放在恒溫振蕩器上,在 24℃±1℃,以250r/min~300r/min,振蕩1min ±5s,然后進行下一步“0”接觸時間取樣。
3、“0”接觸時間取樣
用吸管在“0”接觸時間制樣的6個燒瓶中各吸取1mL±0.1mL溶液,移入裝有9mL±0.1ml0.03moI/LPBS緩沖液的試管中,充分混勻。用10倍稀釋法再進行1次稀釋,充分混勻。吸取1 ml,±0.1ml.移入滅菌的平皿,傾注營養瓊脂培養基或沙氏瓊脂培養基約15ml。每個10^2稀釋信數的試管分別吸液制作兩個平板作平行樣。室溫凝固,倒置平板,37C±1℃培養24h~48h(白色念珠菌48h~72h)。記錄每個平板中的菌落數。
4、定時振蕩接觸
用吸管往3個抗菌織物試樣燒瓶中各加入5mL接種菌液,蓋好瓶塞。已完成“0”接觸時間取樣且蓋好瓶塞的另6個燒瓶不需再加接種液。再將此9個試樣的燒瓶置于恒溫振蕩器上,在24℃±1℃,以150r/min,振蕩18 h。
5、稀釋培養及菌落數的測定
到規定時間后,從每個燒瓶中吸取1mL±0.1ml,試液,移入裝有9ml±0.1mL0.03 mol/L,PBS緩沖液的試管中,充分混勻。用10倍稀釋法系列稀釋至合適稀釋倍數。用吸管從每個稀釋倍數的試管中分別吸取1mL±0.1ml,移入滅菌的平皿,傾注營養瓊脂培養基或沙氏瓊脂培養基約15m。每個稀釋倍數的試管分別吸液制作兩個平板作平行樣。室溫凝固,倒置平板,37℃±1℃培養24h~48h(白色念珠菌48h~72h)。
選擇菌落數在30CFU~300CFU之間的合適稀釋倍數的平板進行計數。若最小稀釋倍數平板中的菌落數<30,則按實際數量記錄;若無菌落生長,則菌落數記為“<1”。
兩個平行平板的菌落數相差應在15%以內,否則此數據無效,應重作試驗。
抗菌測試結果評價
1)根據兩個平板得到的菌落數,計算每個試樣燒瓶內的活菌濃度(保留兩位有效數)。
2)計算試驗菌的增長值F。對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌等細菌,當F大于或等于1.5;對白色念珠菌,當F大于或等于0.7,且對照燒瓶中的活菌濃度比接種時的活菌濃度增加時,試驗判定為有效。否則試驗無效,需重新進行試驗。
3)振蕩接觸18h后,比較對照樣與抗菌織物(或未抗菌處理織物)試樣燒瓶內的活菌濃度,計算抑菌率(保留兩位有效數)。
4)以抑菌率的計算值作為結果。當抑菌率計算值為負數時,表示為“0”;當抑菌率計算值>0時,表示為“≥0”。
對金黃色葡萄球菌及大腸桿菌的抑菌率≥70%,或對白色念珠菌的抑菌率≥60%,樣品具有抗菌效果。
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